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《生物技术》 2017年04期
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莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因-LrNHX的克隆及表达分析

李淑艳  蒋润枝  
【摘要】:[目的]寻求解决莲藕栽培种普遍对盐敏感的途径,从耐盐野生种中克隆了一个候选耐盐基因-LrNHX的全长c DNA序列,并对其表达进行分析,为今后利用基因工程技术改良莲藕耐盐性奠定基础。[方法]根据NCBI数据库中的莲藕Na~+/H~+逆向转运蛋白基因序列设计引物,利用PCR技术在莲藕叶片中克隆LrNHX,再利用半定量RT-PCR研究了250 mmol/L Na Cl处理0 h、6h、12 h、18 h、24 h和30 h时莲藕叶片中LrNHX的表达情况。[结果]LrNHX cDNA全长1 861 bp,编码526个氨基酸。Blast比对后发现该基因和与胡杨(ACX46912.1)、毛白杨(AAX37333.1、番茄(CAC83608.1)、拟南芥(NP 178079.2)的同源性分别达88%、87%、83%、82%。半定量RT-PCR结果表明,该基因在250 mmol/L Na Cl处理12 h后表达显著增高,说明LrNHX受盐诱导。[结论]LrNHX参与了莲藕耐盐信号的转导。
【作者单位】扬州大学广陵学院;扬州大学园艺与植物保护学院;
【关键词】莲藕 LrNHX 克隆 cDNA 表达
【基金】:江苏省高校自然科学基金项目(“转录组结合蛋白质组分离野生莲藕耐盐基因及功能验证”,No.14KJB210012)
【分类号】:Q943.2;S645.1
【正文快照】:
莲藕属于睡莲科莲属多年生水生草本植物,在我国长江中下游以南地区广泛栽培,是一种特色的水生蔬菜,同时也是重要的水旱轮作作物[1-2]。近年来,我国东南沿海地区沿海滩涂面积逐渐扩大,设施土壤连作障碍(盐渍化程度)逐年加重,提高莲藕耐盐特性尤为必要,对充分利用滩涂盐碱土地、

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