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《西北植物学报》 2017年07期
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‘云香’水仙NtWRKYY2基因的克隆及功能分析

温秀萍  孙申申  杨菲颖  陈晓静  
【摘要】:以‘云香’水仙为材料,采用PCR技术分离中国水仙WRKY转录因子家族成员NtWRKYY2(GenBank登录号为KX056496),其开放阅读框(ORF)长度为867bp,编码289个氨基酸。氨基酸序列比对及系统进化树分析显示,NtWRKYY2编码蛋白含1个WRKY结构域和C2H2锌指结构(Csx4Cx23HxH),属于第Ⅱd类WRKY转录因子。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析显示,NtWRKYY2在‘云香’水仙应对盐胁迫中显著上调表达。利用InFusion克隆技术成功构建过表达载体pMDC140-NtWRKYY2,并采用农杆菌介导叶盘法转化烟草,获得11株卡那霉素抗性植株,转化子进一步PCR检测结果显示,其中有8株目的基因已成功导入烟草基因组中,转化率为72%。盐胁迫处理和叶绿素荧光参数分析显示,盐胁迫处理后NtWRKYY2过表达的转基因烟草萎蔫和黄化程度小于野生型植株,Fv/Fm值下降幅度小于野生型植株。研究表明,NtWRKYY2过表达的转基因烟草具有抵抗盐胁迫的能力。该研究为水仙抗盐转基因育种提供备选目的基因。
【作者单位】福建农林大学园艺学院;福建农林大学园艺植物遗传育种研究所;
【基金】:福建省种业创新与产业化工程项目(K8114001B)
【分类号】:Q943.2;S682.21
【正文快照】:
转录因子又叫反式作用因子,是指在真核生物中能够结合到启动子区域激活或抑制靶基因转录进而对靶基因进行表达调控的DNA结合蛋白[1]。常见的转录因子有NAC、MYB、BHLH、ERF、WRKY等,其中WRKY转录因子是植物特有的超级家族蛋白之一。WRKY蛋白通过特异性结合启动子区域的W-Box来

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1 刘景云;;水仙的艺术造型与花期[J];大自然;1987年04期
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3 吕柳新;陈晓静;余小玲;陈景渌;;水仙品种资源的育种基础研究 Ⅰ.多花水仙若干品种类型的细胞学研究[J];福建农学院学报;1989年01期
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