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《病毒学报》 2017年05期
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双重荧光RPA扩增方法快速鉴别两种血清型水泡性口炎病毒

林彦星  曹琛福  曾少灵  杨俊兴  吕建强  刘丽娟  花群义  
【摘要】:本研究利用重组酶聚合酶扩增(RPA)技术,根据水泡性口炎病毒印第安纳型(VSV-IND)和新泽西型(VSVNJ)相对保守的L基因为靶序列设计并筛选出两套特异性的引物和探针,建立了快速鉴别检测水泡性口炎病毒两种血清型的双重荧光RT-RPA方法。试验结果表明,该方法特异性强,与猪水泡病病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、蓝舌病病毒(BTV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、猪瘟病毒(CSFV)等灭活抗原核酸无交叉反应;灵敏度高,最低可检测核酸浓度为12.7fg/μL;简便快速,反应时间短(15min),且重复性好。利用所建立方法对124份临床样品进行检测,结果与双重荧光RT-PCR一致。本文为VSV-IND和VSV-NJ的快速鉴别检测提供一种新方法,尤其适合现场检疫或基层实验室的快速检测。
【作者单位】深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心;中国检验检疫科学研究院;
【基金】:“十三五”国家重点研发计划课题(项目号:2016YFC1200905)题目:重要新发突发病原体应急处置方案与规范研究 “十三五”国家重点研发计划课题(项目号:2016YFD0500708),题目:猪重要疫病分子检测技术研究~~
【分类号】:S852.65
【正文快照】:
2.中国检验检疫科学研究院,北京100176)水泡性口炎(Vesicular stomatitis,VS)是由水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV)引起的一种急性、热性、高度接触性的人畜共患传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为须报告的、可感染多种动物的重要疫病,也是我国进境动物检疫

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